Ágar Gc Base, Frasco Com 500 Gramas M434-500G (Himedia)

MARCA: HIMEDIA – MODELO: M434-500G – PRODUTO: Agar GC Base, Frasco com 500 gramas.

APLICAÇÃO: Recomenda-se o uso do Agar GC Base, com adição de sangue ou hemoglobina e outros suplementos para isolamento seletivo e cultivo de gonococos.

COMPOSIÇÃO:**

Ingredientes Gms / Litro

Peptona, especial: 15.000

Amido de milho: 1.000

Fosfato dipotássico: 4.000

Fosfato monopotássico: 1.000

Cloreto de sódio: 5.000

Agar: 10.000

pH final (a 25°C): 7,2 ± 0,2

** Fórmula ajustada, padronizada para se adequar aos parâmetros de desempenho.

Necessário o uso do suplemento FD021 ou FD022 ou FD023 ou FD024 ou FD025 ou FD026 ou FD027 ou FD028.

INSTRUÇÕES DE USO:

Suspenda 7,2 gramas em 100 mL de água destilada, para formar uma base de força dupla. Aqueça até ferver para dissolver o meio completamente. Esterilize em autoclave a pressão de 15 libras (121°C) por 15 minutos. Arrefecer a 45-50°C e adicionar assepticamente a Hemoglobina preparada separadamente (FD022) (100 mL de solução estéril a 2%) e Suplemento de GC com antibióticos (FD021). Misturar bem e despeje em placas de Petri estéreis. Para aumentar a seletividade meio, suplementos antibióticos como Suplemento V.C.N. (FD023), Suplemento V.C.N.T. (FD024), Suplemento Linco T (FD026) ou Suplemento Vanclo T (FD028) podem ser adicionados. Para melhorar as propriedades nutricionais do meio, o Suplemento de Crescimento Vitamino (FD025) ou Suplemento Autolisado de Levedura (FD027) pode ser adicionados. Para o Agar Sangue chocolate, prepare meio de força única usando 3,6 gramas em 100 mL de água destilada. Esterilize em autoclave a 121 lb de pressão (15 lb) por 15 minutos e adicione 5% v/v de sangue desfibrinado. Misturar bem e aqueça a 80°C por 10 minutos.

Rendimento: O frasco de 500 gramas rende 4,54 litros.

PRINCÍPIO E INTERPRETAÇÃO:

A maioria das infecções gonocócicas são infecções do trato genital inferior, sem complicações, causadas por infecção direta do epitélio colunar das membranas mucosas. Neisseria gonorrhoeae é o agente causador de infecções gonocócicas. A maioria das cepas de Neisseria têm requisitos complexos de crescimento; algumas cepas podem ser primorosamente sensíveis a ácidos graxos, necessitando da incorporação de amido solúvel no meio de crescimento. Johnston desenvolveu um meio que poderia obter o crescimento de Neisseria dentro de 24 horas, em vez das habituais 48 horas. Este meio foi posteriormente modificado por Carpenter e Morton, pela adição de hemoglobina. Thayer e Martin melhoraram a seletividade do meio GC pela incorporação do antibióticos colistina, vancomicina e nistatina (V.C.N.) (FD023). Um antibiótico adicional com trimetoprima lactato foi mais tarde acoplado com V.C.N. para aumentar ainda mais a seletividade do meio (FD024). Para o cultivo de organismos exigentes, o meio deve ser suplementado com fatores essenciais de crescimento, fornecidos predominantemente pelo extrato de levedura (FD027). Isso pode ser substituído por um suplemento quimicamente definido, contendo fatores de crescimento essenciais disponíveis a partir do extrato de leveduras. Suplemento Crescimento Vitamínico (Pacote duplo) (FD025). Fator X necessário para o crescimento da exigente espécie Haemophilus é fornecida pela hemoglobina (FD022). O Meio GC Base pode ser usado como base para a preparação do Meio Thayer Martin pela adição de FD027, que contém autolisado de levedura como fonte de fatores de crescimento essenciais e antibióticos V.C.N.T. como agentes seletivos. Vancomicina (3 mg/litro) em V.C.N.T. O suplemento (FD024) foi substituído por lincomicina, uma vez que o posterior foi menos inibidor dos gonococos. Também a nistatina foi substituída pela anfotericina B (em FD024) para melhorar a seletividade dos contaminantes do meio a leveduras, encontrados regularmente em amostras vaginais. Isso modificou o suplemento Linco T (FD026). Certas cepas de gonococos foram compostas, consideradas sensíveis a 3 mg/lt de vancomicina utilizada regularmente. Portanto, a concentração de vancomicina foi reduzida para 2 mg/litro para obter o crescimento dessas cepas sensíveis. Este suplemento modificado com concentrações reduzidas de vancomicina e anfotericina B é o Suplemento Vanclo T (FD028).

O Agar GC contém peptona especial, que fornece nutrientes essenciais aos organismos. A presença de amido garante que os metabolitos tóxicos produzidos por Neisseria sejam neutralizados. Os fosfatos impedem alterações no pH devido à produção de aminas que pode afetar a sobrevivência dos organismos. O fator X (hemina) necessário para as espécies de Haemophilus é fornecido pela hemoglobina. Os outros suplementos adicionados fornecem fator-V, ou seja, NAD (nicotinamida adenina dinucleotídeo) para espécies de Haemophilus e aminoácidos, coenzimas, íons férricos etc, que melhoram o crescimento de Neisseria patogênica.

Evite algodão para coleta de amostras. Inocule imediatamente após a colheita da amostra. As amostras devem ser riscadas na superfície das placas, de modo a obter algumas áreas muito semeadas e outras áreas levemente semeadas. A incubação é feita a 37°C em uma atmosfera de 70% de umidade e 5-10% de dióxido de carbono. Toda Neisseria presuntiva deve ser confirmada por testes de fermentação de carboidratos e outros testes sorológicos.

CONTROLE DE QUALIDADE:

Aparência: pó homogêneo de fluxo livre creme a amarelo.

Gelificação: Firme, comparável com gel de Agar a 1,0%

Cor e Clareza do meio preparado: Meio basal: Gel de cor amarelo claro a ligeiramente opalescente. Após adição de 2% de hemoglobina: formas de gel marrom chocolate opaco colorido em placas de Petri.

Reação: Reação de solução aquosa a 3,6% p/v a 25°C. pH: 7,2 ± 0,2

pH: 7,00-7,40

Resposta Cultural: Características culturais observadas na presença de 5-10% de dióxido de carbono (CO2) e 70% de umidade com adição de Hemoglobina estéril a 2% (FD022) e suplemento de GC com antibióticos (FD021), após uma incubação a 35-37°C por 40-48 horas.

ARMAZENAMENTO: Armazenar o pó a temperatura ambiente abaixo de 30ºC e o meio preparado de 2 a 8°C. Use antes da data de expiração do produto.

REGISTRO ANVISA: Produto considerado não correlato pela Anvisa.

APRESENTAÇÃO / EMBALAGEM: Frasco com 500 gramas

*** Imagem meramente Ilustrativa ***